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Efecto de la dosis de cipionato de estradiol al finalizar un tratamiento con
progesterona sobre el porcentaje de preñez a la IATF en vaquillonas.
Butler H.M. (1), Butler A.(1), Etcheverry E.(1), Cesaroni, G.C (1). (1)Veterinarios Asociados a Sincrovac SH, Juncal 2092 3P.Buenos Aires, Argentina. El presente trabajo se realizó para evaluar el efecto de la dosis de cipionato de estradiol aplicada al finalizar un tratamiento con un dispositivo intravaginal liberador de progesterona sobre la tasa de gestación después de una IATF. Se utilizaron 100 vaquillonas Angus de 24 meses de edad ginecológicamente aptas, con una condición corporal de 3,5 (escala 1-5), a las que se les colocó un dispositivo intravaginal liberador de progesterona (DIB® 0,5 g Syntex) y se les aplicó 2 mg de benzoato de estradiol (Benzoato de Estradiol® Syntex). A los 8 días se retiraron los DIB y se asignaron al azar a dos grupos de 50 vaquillonas, a los que se aplicó respectivamente 0,5 ó 1,0 mg de cipionato de estradiol (Cipiosyn® Syntex). Simultáneamente se inyectó 500 µg de cloprostenol sódico (Ciclase DL® Syntex) en ambos grupos. La IATF se realizó entre las 52-53 hs después de retirados los DIB. El semen utilizado fue del mismo reproductor. El diagnóstico de gestación fue realizado por medio de ultrasonografía a los 33 días posteriores a la IATF. La tasa de preñez fue de 54 y 56 % para 0,5 y 1,0 mg respectivamente (P > 0,05). Los porcentajes de gestación fueron comparados por medio de la prueba del Chi cuadrado (α = 0,05). Palabras clave: Vaquillonas. IATF. Cipionato de estradiol. Fertilidad. Effect of different dose of estradiol cypionate, measured by the pregnancy rate at FTAI
in heifers, treated with an intravaginal progesterone device.
The aim of this assay was to evaluate two different dose of estradiol cypionate (ECP) injected at the end of an intravaginal progesterone treatment. The experiment was carried out with 100 pubertal Angus heifers; 24 months old; with a body condition score of 3.5 (scale 1-5). The heifers were treated with a progesterone intravaginal device during 8 days (DIB® 0,5 g Syntex). At the beginning of the treatment all females were injected with 2 mg of BE and at the end, heifers were randomly assigned to two groups, each one of 50 females, injected with 0.5 mg or 1 mg of ECP respectively (Cipiosyn® Syntex). All the heifers received a full dose of a synthetic Cloprostenol (500 mcg) (Ciclase DL ® Syntex) at the end of the hours after the withdrawal of the device. The semen was the same for each group and the results were statistically checked by the Chi Square test. Pregnancy diagnosis was made by ultrasonography 33 days after FTAI. The pregnancy rates were 54 and 56 % for 0.5 and 1.0 mg respectively (P > 0.05). In summary, pregnancy rate to FTAI did not differ between heifers treated with ECP dose, 0.5 or 1.0 mg, given at the end of a treatment with progesterone intravaginal device. Key words: Heifers. Fixed-time AI. Estradiol cypionate. Fertility Introducción
La inseminación artificial a tiempo fijo (IATF) es la biotecnología reproductiva que ha alcanzado mayor difusión y extensión en la última década. Además de la mejora que implica su implementación, la simplicidad de su aplicación ha facilitado su desarrollo. En este sentido, cualquiera sea el protocolo que se utilice, este se basa en sincronizar la onda folicular e inducir una ovulación fértil. La sincronización de la onda folicular se logra por medio de la asociación de la progesterona liberada por el dispositivo intravaginal o un progestágeno en caso de implantes subcutáneos y la aplicación de una sal de estradiol, ya sea benzoato o valerato si se trata de un dispositivo intravaginal o un implante respectivamente (5). Esta combinación provoca la regresión de la onda folicular presente y el surgimiento de una nueva onda sincronizada a los 3-4 días (1). La sincronización de la onda pre-ovulatoria de LH y por lo tanto las ovulaciones, se logra por medio de la aplicación de benzoato de estradiol (BE) al momento de retirar la fuente de progesterona (20,26) o 24 hs más tarde (6, 11,13). Otra forma de inducir sincronizadamente la onda pre-ovulataria de LH, es aplicando GnRH al momento de la IATF (10). Si bien los resultados de preñez son similares a los obtenidos cuando se aplica estradiol (7,31), su costo es significativamente mayor (entre 20 y 40 veces más). Por lo tanto y en términos generales, el protocolo que más se utiliza es aplicar estradiol al retirar la fuente de progesterona o 24 horas más tarde. La aplicación del BE al momento de retirar la fuente de progesterona, evita un movimiento adicional de las hembras, hecho que bajo las condiciones de explotación extensiva de la ganadería en nuestro país es de una gran relevancia. El momento de la aplicación del BE ha generando controversias, aunque en términos generales, aplicándolo al momento del retiro o a las 24 hs, la tasa de preñez a la IATF, no ha mostrado ser diferente (2, 26,29). En otros trabajos se muestran diferencias en la tasa de preñez, pero es importante señalar que en esos trabajos hay dos variables interactuando: momento de aplicación y momento de la IATF (12,13, 28). Fernández Francia y col. (15), y Zapiola y col. (33) no encontraron diferencias en la tasa de preñez en vaquillonas IATF luego de haber sido tratadas con BE a la 0 ó 24 hs de retirados los dispositivos. Sin embargo en ambos trabajos, el momento de la inseminación fue diferente según el momento de aplicación del estradiol. Una opción alternativa para la sincronización de la onda pre-ovulatoria de LH y la ovulación utilizando el estradiol como inductor, es la utilización de otra sal de estradiol de vida media más prolongada, como es el cipionato de estradiol (ECP) (32). Se ha demostrado que con la aplicación de 0,5 mg de ECP al momento de retirar la fuente de progesterona, se logran porcentajes de preñez similares a los obtenidos con BE (8, 19, 25). Posteriormente, se realizaron trabajos con el objetivo de evaluar si aumentando la dosis de ECP a 1,0 ó 1,5 mg se podía mejorar la fertilidad (9, 17, 23). Los resultados obtenidos no mostraron diferencias según dosis utilizadas. Los objetivos del presente trabajo fueron: a) evaluar el efecto de la dosis (0,5 ó 1 mg) de ECP aplicado al finalizar un tratamiento intravaginal con progesterona e IATF sobre la fertilidad y b) secundariamente, aumentar la casuística para determinar la dosis apropiada. Materiales y métodos
Se utilizaron 100 vaquillonas Angus de 2 años de edad con un estado corporal de 3.5 (escala 1-5) y en las que se realizó palpación por vía rectal para evaluar su aptitud reproductiva. Se consideró apta a aquella vaquillona que tuviese un buen desarrollo uterino, al menos un ovario mayor a 1,5 x 2 cm y estructuras palpables. Las vaquillonas aptas fueron tratadas con un dispositivo intravaginal conteniendo 0,5 g de progesterona (DIB® 0,5 Syntex) y se les aplicó una inyección de 2 mg de BE (Benzoato de Estradiol® Syntex). A los 8 días los dispositivos fueron retirados y se aplicaron 500 µg de Cloprostenol sódico (Ciclase DL® Syntex) a todas las vaquillonas, asignándose al azar a dos tratamientos: T1 (n = 50) 0,5 mg de ECP y T2 (n = 50) 1,0 mg de ECP. El semen utilizado fue del mismo reproductor y de la misma partida. La IATF fue realizada entre las 52 y 53 hs de haber retirado los dispositivos con el mismo semen y un mismo operador para ambos tratamientos. El diagnóstico de gestación fue realizado por medio de ultrasonografía (Aloka SSD 500) a los 33 días posteriores a la IATF. Los porcentajes de gestación fueron comparados por medio de la prueba de chi cuadrado (α = 0,05). Resultados
Los resultados se observan en la Tabla 1. Tabla 1. Porcentajes de preñez obtenidos con diferentes dosis de cipionato de estradiol (ECP) al finalizar un tratamiento con DIB e IATF Discusión
La aplicación de estradiol, en sus diferentes sales y dosis, ya sea al principio o al final de un tratamiento con progesterona para sincronizar celo y ovulación, ha sido objeto de numerosos estudios (1, 6, 8, 14,22). Esta última aplicación es indispensable para lograr sincronizar el nacimiento de una nueva onda folicular (4), y para obtener una ovulación concentrada entre las 58 a 64 hs de finalizado el tratamiento. Si no se aplicase estradiol al inicio de un tratamiento con progesterona, se obtendría una baja sincronización de las ondas foliculares con una baja tasa de fertilidad (20). Por un lado muchos folículos persistirían en el tiempo con ovocitos que retoman su meiosis antes de la ovulación con su consecuente baja fertilidad (3,27) y por el otro, la sincronización del celo, dependería más del día en el ciclo estral en que la fuente de progesterona fue aplicada (regresión del la primera onda folicular, día 11) que de un mecanismo fiable para realizar una IATF (21). La aplicación de ECP al finalizar un tratamiento con progesterona fue evaluado por diferentes autores (1, 8, 14,21) para, por un lado intentar mejorar la fertilidad y por el otro, como se describió anteriormente, evitar un cuarto movimiento de las hembras tratadas como en el caso de aplicar BE a las 24 hs post finalización del mismo. La fertilidad se podría ser mejorada por la acción del estradiol, supuestamente, ya que no está del todo esclarecido, por un incremento en la luteinización de las células de la teca interna y de la granulosa del folículo con la consiguiente mejora en la calidad del cuerpo lúteo. Durante la fase folicular, el estradiol es un factor mitógeno muy importante para la multiplicación celular de la granulosa (16), células que van a dar origen a las células grandes del cuerpo luteo y que además producen el 80% de la progesterona, sin ser su producción dependiente de la LH (14,16, 18,). Luego de la ovulación, las células pequeñas del CL que tienen su origen en las células de la teca interna, multiplican su número por 5 a través de la estimulación de la LH, a su vez segregada por el feed back positivo del estradiol. (16, 18). Los resultados observados en este trabajo establecen que la dosis de ECP (0,5 ó 1,0 mg) no tiene influencia sobre la tasa de gestación obtenida en vaquillonas después de un tratamiento intravaginal con progesterona e IATF, en concordancia con los resultados obtenidos por Madero y col (21) y Uslenghi y col (30). Otros trabajos orientados a determinar la dosis óptima de ECP y su relación con la tasa de preñez, determinaron que no hubo diferencias entre usar 0,5 ó 1,0 mg (9,17) o entre usar 1,0 ó 1,5 mg (23). Aunque dosis de ECP entre 0,5 y 1,0 mg no tendría efecto sobre la tasa de fertilidad, sí la podría tener sobre el comportamiento de las vaquillonas durante el celo. Reames y col.(24) en vacas ovariectomizadas y utilizando diferentes dosis de 17beta estradiol al final de un tratamiento con progesterona, demostraron que hubo diferencias en la presentación del estro (porcentaje de hembras, momento del comienzo, duración e intensidad). Este punto puede ser de relevante importancia cuando se decide no realizar una IATF luego de un tratamiento con progestágenos y detectar celo (ej. en transferencia de embriones). Asimismo, una conducta exagerada de celo puede ocasionar una actividad de monta exagerada que puede producir lesiones, aunque raras veces, ocurre. Por lo tanto, si bien no habría inconvenientes en incrementar la dosis en cuanto a fertilidad se refiere, se debería tener presente las consideraciones antes mencionadas. Nosotros consideramos que existe una aplicación práctica el tener presente que un rango de 0,5 a 1,0 mg de ECP no afecta la fertilidad. En rodeos comerciales de grandes cantidades de animales, no es necesario un enrasado perfecto de la dosis a administrar, existiendo una flexibilidad de la misma en la que no se verá afectado el resultado de la fertilidad. Bibliografía
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Source: http://www.sincrovac.com.ar/papers/Sincrovac-Paper3-Efecto-dosis-cipionato-estradiol.pdf